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石蜡包埋组织亲子鉴定的案例应用

    台胞陈某在大陆南方某城市投资一家食品加工企业,不幸罹患胃癌住院手术治疗,手术切除的组织被制备成石蜡包埋组织和H.E染色切片用于档案保存和医疗诊断。陈某最终因病情恶化不治死亡,其身后留下的企业财产依法应由子女继承,但当陈某儿子持陈某在台湾登记注册的有关证件办理相关继承财产的法律手续时,却发现陈某在大陆是用不同的名字登记注册公司的。于是相关部门对陈某与其儿子父子关系的真实性产生了疑虑,逐要求陈某儿子提供亲子关系鉴定证明以后方可办理遗传继承。但此时死者已经被火葬,唯一可以提供亲子鉴定的生物材料就是其在医院手术后留下的石蜡包埋病理组织。

    检验者首先在显微镜下观察由该石蜡包埋组织块制备而成的H.E病理染色切片,区分癌变组织及周围的正常组织,将其放在二甲苯中脱蜡至盖玻片脱落,小心将癌变组织和正常组织分别移取至不同的离心管中用标准程序进行DNA抽取和分型。因此,正常组织显示正常的STR分型图谱,用其数据与陈某儿子血样基因型数据进行亲缘关系分析,结果表明,二者之间存在亲生血缘关系,累积亲权指数为206 438.36

石蜡包埋组织及正常组织和陈某儿子血样基因型

基因座

石蜡包埋组织

正常组织

陈某儿子血样

D8S1179

11

15

 

11

15

11

15

D21S11

30

31

 

30

31

30

32.2

D7S820

10

11

 

10

11

8

10

CSF1PO

12

12

 

12

12

12

12

D3S1358

16

16

 

16

16

16

16

D5S818

13

13

 

13

13

11

13

D13S317

9

 

 

9

11

9

10

D16S539

9

11

 

9

11

9

13

D2S1338

17

20

 

17

20

17

23

D19S433

13

14.2

 

13

14.2

13

14

vWA

14

17

 

14

17

17

17

D12S391

18

19

 

18

19

18

22

D18S51

16

20

21

16

21

12

16

D6S1043

12

19

 

12

19

12

13

FGA

18

24

 

18

24

18

21.2

AMEL

X

Y

 

X

Y

X

Y

癌变组织在基因座D13S317上完全丢失等位基因11;在基因座D21S11D7S820D19S433vWAD12S391Amelogein上一个等位基因部分丢失;基因座D18S51增加了额外的等位基因20

当石蜡包埋组织或病理染色切片被用于鉴定材料时,癌变组织的微卫星不稳定性是亲子鉴定或个体识别的最大隐性风险,等位基因的丢失或增加容易导致杂合子或纯合子的误读。在亲子鉴定中,若等位基因的变异恰好发生在亲代和子代的传递基因上,容易引导得出错误的鉴定结论。以此案为例,若D13S317基因座上发生的不是等位基因11的完全丢失而是等位基因9的完全丢失,则会得出错误的排除结论。因此,在用石蜡包埋病理组织作为亲子家电宁检验材料进行DNA分型时,如若发现等位基因扩增不均衡的STR分型图谱,应引起鉴定人员的足够重视,最好的方法就是经过显微镜观察鉴别正常和病变组织,尽量取病变组织边缘的正常组织进行DNA分析,最大可能地避免由于病变组织STR变异导致的错误鉴定结论。

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