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DNA鉴定之DNA数据库的标准化与质量控制

      标准化是建立DNA数据库的前提及基础,是建库的首要环节。DNA数据库能否成功应用的关键是不同实验室、不同实验者对同一样本测试得到的基因型完全一致,否则就不可能为法庭科学提供正确的信息及线索。只有实行标准化及质量控制标准,才能建立高质量的数据库。建立DNA数据库的目的是迅速而有效地识别可能逃逸的暴力犯罪嫌疑人,为侦查破案服务,所以它依靠准确无误的大规模的信息进行查询比对,从中得到有价值的线索,这就意味着有关数据一旦进入数据库,几乎无法纠错,所以准确性对于建库至关重要。任何环节有误均可导致假排除或假认定两类错误,两种后果都十分严重,第一类错误可使罪犯逍遥法外,即使再怍案也依然被排除,第二类错误可导致错误执法,造成冤假错案而真正的凶手却逃于法网之外。所以对技术方法的筛选、参数指标的制定、人员及实验条件的审核、质量保证体系的建立等都是围绕数据正确这一中心问题。欧美等发达国家在八十年代末就成立了有关DNA检验标准化及质量控制方面的机构,负责制定及落实DNA检验技术方法标准及质量控制体系。1989年,由欧洲国家警察组织、大学、研究所等机构的实验室组成的欧洲DNA分型小组(Eurol)ean DNA Profling Group,EDNAP)就已成立,此外,较有影响的国际法医血液遗传学会(Intemational Society for Forensic Haemogenetics,ISFH);美国DNA分析方法技术工作小组(Technical Working Group on DNA Analysis Methods,TWGDAM)等,这些组织对DNA分型技术操作及结果分析等进行标准化规定,使分型结果具有可比性及兼容性。拉丁美洲也成立了DNA分析工作小组(Ibero American Working Group on DNA Analysis,GITAD)联合19个西班牙语及2个葡萄牙语国家酌DNA试验室制定了有关DNA分型技术建议或质量保证体系。
      英国从开始用单位点探针杂交技术建库就十分重视质量控制,尽管技术上不断修订,但一直把输入数据正确无误作为首要工作,建立可操作的严格的流程模式并将其制度化,在人员方面对人员进行专门培训及再训练,并实行严格的淘汰性测试,在样本采集方面设计专门的工具盒及个人信息记录表格,制作采样培训录象带,将所有个人信息由录入人员录成一个电子表格,然后输入到数据库中并与DNA分型结果相关联。对样本存放、DNA提取方法、定量、扩增DNA模板用量、扩增程序、试剂、电泳分析方法、设备等均做了详尽的规定。等位基因分析由2名操作员独立进行,并由另一名技术人员处理2套结果间差异,在实验室取检测样本的10%用于盲测,每周还将不完全匹配的样本进行多至13~ 14个基因座的检测,以保证等位基因型判读的准确性。
      美国为了保证其CODIS数据库中的信息准确可信、并具备法律效力,DNA咨询委员会(DAB)向FBI推荐建立了一套质量保证标准-DNA法庭检测实验室质量保证标准。这一套标准已经在1998年10月1日起生效,它规定的范围很广,从质量保证程序、组织管理、职员、人员考核、设备、物证控制、分析程序、报告、核查、纠错、安全等诸多方面对实验室进行了全面的规定。建库的质量保证是一种系统性工程,进行DNA法庭检验的实验室必须遵守“DNA法庭检验实验室质量保证标准”。这套标准成为CODIS建库的质量保证体系的主体。在这个系统中,对实验室的一些日常行为也有全面的规定。实验室应该有一份大纲性的质量保证程序文件,并且应该用文件记录实验室各种行为,包括各职员的责任、权力、相互关系,建立严格的实验室组织管理;实验室无关人员不能随意进入;实验室的物证要得到很好的保护,保存,及相应的文件记录和标记。实验室内所有的实验操作都经过技术主管研究和书面确立。设备应该保持清洁和监控,在需要的时候要进行校准;所有的实验报告和文件要完整,并接受复查,以及时发现错误并改正。每年都要进行审查,以确认实验室符合标准规定s在这样一套标准的保证下,CODIS系统的数据是科学严谨、具备法律权威性的。除了遵循DNA检验中的赝量保障体系外,在规定建库的方法和标准后,为了确保入库数据的准确性,还增加了许多措施,CODIS系统在实验质检方面具有代表性,措施如下:1)每批次检验,均有已知标准对照,2)每批次样本有10%以盲测形式进行重复检验,3)质量保证工作组每月将5个已知分型结果的样本混入送检样本中,4)每周进行匹配检查,检查是否有错误命名,5)通过行业外IS09000认证体系进行检查及审核。只有完全符合上述条件的实验室才可继续检验,否则将取消资格,直至重新复查合格后方可继续进行并使用CODIS系统。在大量样本检验、储存之前,必须制定接触、检验、使用DNA样本及DNA数据库的法律条文及相应的处罚条例,以防止错用和滥用DNA数据库的资料。州及地方实验室进入CODIS系统也有严格的条例规定,受到联邦韵限锘iJ,这既是保密的需要,也是质量控制的需要。为了加速DNA建库,不断增加CODIS系统在调查犯罪方面的应用价值,FBI主动与州及地方实验室合作,支持州及地方立法同意DNA建库,由FBI提供计算机及分析软件和网络服务,并通过培训及技术支持将FBI认为成熟、行之有效的检验方法及标准传授给州及地方实验室,以加速CODIS泵统的建立,扩充CODIS系统的数据及信息。
 

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