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DNA亲子鉴定之商业化STR试剂盒

      很多单个或复合扩增的STR遗传标记商业化试剂盒用于DNA分型。两个主要的法医DNA试剂销售商是:Promega公司(t位于美国威斯康星州的Madison),AB公司(位于美国加州的Foster City)。在过去的十年中,这些公司进行了大量工作,以试剂盒的形式为法庭科学提供可用的STR遗传标记。最近在欧洲,像Serac(Bad Homburg, Germany)、Biotype (Dresden,Germany)这样的公司也开始提供商品化的STR试剂盒。

      从20世纪90年代后期,检测技术开始飞速发展,检测STR等位基因的方法更加灵敏、快速、准确。同时,可复合扩增大量STR,从银染系统的3、4个复合扩增到15个STR的多色荧光标记。
     美国CODIS采用的13个核心基因座,促进这些STR遗传标记复合扩增的发展。在世纪交替之际,要得到全部I3个STR的信息需两个PCR反应:PowerPlex®1.1和PowerPlex®2.1,或Profiler PlusTM和COfilerTM。为了减少样本混淆的可能性,作为内部检测,试剂盒产品包含重叠的基因座,以便扩增相同来源的生物检材时获得相同的数据。Ptofiler PlusrTM和COflerTM共有基因座为D3S1358 、D7S820,PowerPlex®1.1、PowerPlex®2.1共有基因座为TH01、TPOX、VWA。
      自从2000年开始,Promega和AB公司都推出了复合PCR反应产品,在单个反应中同时扩增13个STR并加人性别分型标记和两个额外的基因座。PowerPlex~ 16的电泳片段分离PCR产物是可视的彩色基因座图,各种颜色交替。AB公司的AmpFlSTR® Identifiler丁M试剂盒等位基因ladder。
     在技术章节中将会讨论现代法医DNA实验室分离检测荧光标记STR等位基因的两种基本方法。上述试剂盒通常使用ABI毛细管电泳系统310或3100遗传分析仪进行分析。有一些PowerPlex试剂盒可以用日立FMBIOⅡ扫描仪分析。
      商品化的STR试剂盒是经过大量研究后选择确定的遗传标记,并分析了引物对之间能否匹配和它们在复合扩增中能否联合使用(Wallin et al.,2002; Krenke et al,,2002)。Promega公司发布和申请了他们PCR引物序列的专利(Masibay et al.,2000; Krenke et a1.,2002)。尽管一些引物序列信息已经为大众所知,AB公司仍保留引物序列的所有权。早期的法庭案件中,由于无法说明试剂盒的引物序列,STR技术不为法庭所采纳,现在不再有这些问题。
      大多数实验室没有时间或来源进行引物设计、PCR复合条件优化和引物合成的质控。广泛使用的试剂盒和其条件,增加了实验室间共享数据的机会,无惧无效的等位基因。在包含的基因座、联合使用的荧光染料、标记的DNA链、提供的等位基因ladder及PCR扩增时使用的引物等方面,现已使用的STR复合系统均有所区别。需要谨记的是商业试剂盒快速指明了多数法医实验室可选用的STR。
 
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