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DNA鉴定之甲醛固定相石蜡包埋组织及病理切片DNA提取

      甲醛固定和石蜡包埋组织中的DNA因受甲醛作用脆性增加,受机械剪切力作用后容易发生断裂。因此,提取DNA过程中,应尽量减少提取过程中的操作步骤,减少对DNA分子的额外损伤。此外,甲醛固定和石蜡包埋组织提取的DNA中存在着一些不能通过蛋白酶K消化和有机萃取法去除的PCR反应抑制因子,如某些染色剂小分子对DNA聚合酶的抑制,以及DNA严重降解后出现的大量寡核苷酸碎片可竞争性结合PCR反应体系中的Mg2+,降低Mg2上的有效浓度,从而降低Taq酶的活性,同时还可干扰引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。这种抑制剂作用随检材量的增加,其抑制效果越加明显。因此,对于甲醛固定和石蜡包埋组织及病理切片DNA的提取,以及对DNA模板的进一步纯化相当必要。目前比较有效的提取方法是以硅基质作为提取纯化DNA的材料的QIAGEN法和IQ法,以及比较廉价简便的Chelex-100法。

 
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