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亲子鉴定之DNA自动测序仪

      目前的DNA自动测序,均采用荧光标记及激光检测系统。一粪采用平板电泳分离原理的测序仪,如ABI 377型,另一类是采用毛细管电泳分离原理的测序仪,如ABI 310、3100型等。ABI 377型自动DNA测序仪,采用四种荧光染料标记,标记终止物ddIVIP或引物5’端两种方式均可采用。测序反应产物带有不同荧光标记,一个样品只占一个泳道上样,经电泳后A、C、G、T各个荧光谱带分开,经激光检测器同步扫描,荧光物经激光激发后,A、C、G、T分别产生绿、红、蓝、黄四色荧光,经光栅分光后被CCD摄像机接收后同步成像,传输到电脑中分别以绿、红、蓝、黄四种颜色存储,电泳结束后,利用测序分析软件自动分析结果。四种荧光染料分子量比较接近,因此产生的谱带间距相等。377型DNA测序仪有四种类型:377 - 18、377 - 36、377 - 64、377 - 96,一次检测样品数目分别为18、36、64、96个。
      377型DNA测序仪自动化程度高,有较高的精确性,还有以下实用特点:①多重荧光标记代表不同碱基信息,经光栅分光可分别检测并存储,一次扫描可完成4种荧光的检测;②分析效率高,测序速度高达200bp//j、时,一次电泳需6~8小时;③测序片段较长,可测定700多个碱基的DNA斤段;④电泳参数设置、数据收集分析以及结果输出均由电脑控制,并设置有对仪器运行状态的同步监测。结果的输出方式有凝胶图谱、荧光吸收峰图、碱基排列顺序等3种,可供选择;⑤采用水浴循环泵和温度检测器实时监测,电泳温度恒定,还可调节温度适应各类特殊电泳要求;⑥软件采用人机界面,简便易学,配有多种软件,适于多种用途分析,如DNA片段大小和定量分析、SSCP分析等;⑦简化制胶程序,灌胶方便快捷;⑧测序方法灵活多样,PE公司可提供20多种试剂盒,可满足不同工作的需要;提供三种不同长度的凝胶电泳板,可根据对电泳时间和样品分辨率的不同要求选择,不仅可进行DNA序列分析,还可对DNA片段进行长度分析(分辨率可达lbp)和定量分析。
 

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