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DNA鉴定之有机溶剂提取DNA有哪些步骤?

     染色质中DNA和蛋白度大约各占一半,DNA和蛋白质均是大分子物质。提取DNA的基本原理是利用DNA和蛋白质对提取过程中各种试剂如蛋白酶、有机溶剂(苯酚、氯仿、乙醇)等不同的反应或溶解性来达到彼此分离的目的。一个典型的提取程序包括下面四个步骤:

    (1)在弱碱和螯合剂存在的条件下进行组织匀浆,溶解细胞或细胞核膜。

    (2)利用去垢剂和蛋白酶消化蛋白质,分离DNA。

    (3)用有机溶剂如苯酚、氯仿,除去残余蛋白质,萃取DNA。

    (4)用乙醇或某些盐类从溶液中沉淀DNA。

    以酚/氯仿抽提为主的有机溶剂提取法是DNA提取的经典方法,用这些方法可获得100~ l000kb左右的基因组DNA,而且提取的DNA纯度高,可用于RflPs以及以PCR为基础的所有法医DNA分析技术。

 

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