DNA亲子鉴定即STR分型检测一般实验对样本的要求:细胞数量≥106个,DNA含量>20ng/µl,体积大于20µl。对于人体组织块样本是怎样提取DNA的呢?
a) 取适量组织块,用纯水冲洗;
b) 剪碎(或研磨成碎块),加入1 mL STE提取液(100 mmol/L NaCl,10 mmol/L Tris-HCI,1 mmol/LEDTA,pH8.0),混匀后加入20% SDS 75 µL,10 mg/mL 蛋白酶K 40 µL,于56℃酶解至清;
c) 于1.5 mL离心管中加入200 µL 10% Chelex 100(100-200目),加入上述酶解后溶液20 µL,混匀;
d) 56℃保温30 min;
e) 剧烈振荡5-10 s;
f) 沸水煮8 min;
g) 剧烈振荡5-10 s;10,000-15,000 r/min离心3 min;取上清液用于扩增反应;
h) 2-8℃保存或冻存剩余DNA,再次使用时重复步骤g)。